- Co je koronavirus a jak infekce probíhá?
- Testy na koronavirus – jaký laboratorní test si mám vybrat?
- Testy na koronavirus – Molekulární testování
- Testy na koronavirus – Imunotest
- Testy na koronavirus – Rychlé diagnostické testy
- Testy na koronavirus – jak vypadá sběr výzkumného materiálu?
- Testy na koronavirus – kdo by měl test provést?
- Testy na koronavirus – jak interpretovat výsledky imunologických testů?
- Testy na koronavirus – jak interpretovat výsledky molekulárních testů?
- Testy na koronavirus – kde je lze provést?
Pomozte vývoji webu a sdílení článku s přáteli!
Během pandemie koronaviru SARS-CoV-2 je včasná a spolehlivá diagnóza klíčem ke kontrole šíření infekce. K tomuto účelu slouží diagnostické testy, zejména molekulární a imunologické testy. Na trhu jsou přitom stále více dostupné rychlé kazetové testy na koronaviry. Které testy na koronavirus si mám vybrat a jsou všechny spolehlivé?
Testy na koronavirusjsou nezbytné k určení infekce koronavirem SARS-CoV-2. Příznaky infekce nejsou jednoznačné a někdy se ani neobjeví. Proto se pro diagnostiku používají testy – většinou molekulární a imunologické, i když existují i testy kazetové.
Co je koronavirus a jak infekce probíhá?
Těžký akutní respirační syndrom coronavirus 2 (SARS-CoV-2) je nový virus, který způsobuje onemocnění COVID-19. SARS-CoV-2 patří do rodiny koronavirů, která zahrnuje také viry SARS-CoV a MERS-CoV. Koronavirus SARS-CoV-2 byl na začátku ledna 2022 identifikován jako příčina epidemie zápalu plic v čínském Wu-chanu. Poté, co byly v Číně nakaženy a zabity tisíce lidí, se koronavirus rozšířil po celém světě a způsobil pandemii.
K přenosu koronaviru z člověka na člověka dochází kapénkami při těsném kontaktu a prostřednictvím povrchů kontaminovaných sekretem nemocného člověka. Hygiena rukou je proto nezbytná pro prevenci nákazy koronavirem.
Hlavní příznaky infekce jsou:
- horečka nad 38 °C,
- kašel,
- únava,
- dušnost,
- a bolest v krku,
- bolest hlavy,
- konjunktivitida,
- ztráta chuti a vůně
- a gastrointestinální problémy.
Příznaky se objeví do 14 dnů po kontaktu s koronavirem. Ve většině případů (97,5 %) však začínají do 11 dnů.
Na tomto místě je však třeba zdůraznit, že příznaky koronavirové infekce se u každého člověka liší, od asymptomatické infekce až po těžké respirační selhání a tzv. cytokinová bouře. Poslední jmenovaní jsou zvláště zranitelní vůči lidem z vysoce rizikových skupin, jako jsou senioři nebo nemocníkoexistující (diabetes a kardiovaskulární onemocnění).
Italská kohortní studie provedená ve městě Vó Euganeo Dr. Lavezzem a kolegy zjistila, že 50–75 % lidí, kteří mají pozitivní test na výtěry z krku, zůstává asymptomatických, zatímco u jiných se rozvinou mírné příznaky podobné chřipce. Naproti tomu pouze 10 % všech symptomatických pacientů má závažnější projevy infekce.
Testy na koronavirus – jaký laboratorní test si mám vybrat?
Pro stanovení infekce koronavirem SARS-CoV-2 je nutné provést specializovaná laboratorní vyšetření, protože to není možné pouze na základě klinických příznaků. V současné době se používají dva typy laboratorních testů na koronavirus:
- molekulární (genetické) testy
- imunologické testy (sérologické nebo antigenní)
Pamatujte, že diagnostická hodnota výše uvedených testů se může lišit.
Testy na koronavirus – Souhrn testů na koronavirus [TABULKA]
| Molekulární (genetické) testy | Imunologické (sérologické) testy | Testy kazet | |
| Metoda výzkumu | RT-PCR v reálném čase | imunoenzymatické nebo imunochemické metody | imunochromatografické metody |
| Testovací materiál | výtěr z krku nebo nosohltanu | žilní krev | kapilární krev odebraná z prstu |
| Zjišťuji co? | genetický materiál viru - RNA | IgM, IgA nebo IgG protilátky proti viru | IgM, IgA nebo IgG protilátky proti viru |
| Hlavní účel studie | potvrzení aktivní infekce | potvrzení infekce | potvrzení infekce |
| Místo provedení | laboratoř | laboratoř | domov nebo lékařské místo |
| Cena testu | 450–500 PLN | 100–220 PLN | 30–60 PLN |
| Čas čekat na výsledek | až 3 dny | až 3 dny | od několika minut do 1 dne |
Testy na koronavirus – Molekulární testování
Molekulární testy založené na reverzní transkripční polymerázové řetězové reakci (RT-PCR) v reálném čase jsou jediné, které Světová zdravotnická organizace doporučujepotvrdit aktivní infekci koronavirem.
Testy založené na RT-PCR v reálném čase spoléhají na vícenásobnou replikaci v několika desítkách cyklů specifického fragmentu genetického materiálu koronaviru, tedy RNA. K tomu se používá enzym zvaný polymeráza a specifické páry primerů, které odpovídají danému fragmentu RNA viru. V případě koronaviru SARS-CoV-2 je to např. fragment kódující nukleokapsidový (N) nebo obalový (E) protein.
Další fází diagnostického procesu je vizualizace namnoženého fragmentu genetického materiálu pomocí speciálních fluorescenčních barviv. RT-PCR v reálném čase je díky amplifikaci specifických fragmentů virového genetického materiálu a použití fluorescenčních barviv ultracitlivou metodou ve srovnání s jinými molekulárními metodami. Je tedy schopen detekovat i malé množství koronavirových částic v testovaném biologickém materiálu.
Pro získání co nejspolehlivějších výsledků se samozřejmě během samotného testu RT-PCR v reálném čase používá řada vnitřních kontrol: pozitivní, což je virová RNA, a negativní, což je obvykle voda.
Je důležité vědět, že omezením molekulárních metod je možnost získání falešně negativních výsledků, které mohou být způsobeny nesprávnou metodou vzorkování nebo nesprávným časem vzorkování.
Obvykle se pro molekulární testování u asymptomatických lidí odebírá materiál z horních cest dýchacích, např. výtěr z nosohltanu, ve kterém se počet částic koronaviru v průběhu času po infekci postupně snižuje.
Materiál získaný z dolních cest dýchacích, jako je sputum, alveolární-bronchiální tekutina (BAL) nebo bronchoaspirát, je nejlepší, ačkoli se obvykle odebírá od lidí s vážnými příznaky infekce koronavirem.
Závěrem lze říci, že molekulární testy jsou v současnosti jediné, které Světová zdravotnická organizace doporučuje k potvrzení aktivní infekce koronavirem SARS-CoV-2. Molekulární testy však na otázku, zda se již člověk nakazil, neodpoví. To je možné díky imunologickým testům.
Testy na koronavirus – Imunotest
Imunoanalýza na koronaviry měří přítomnost imunitních proteinů (protilátek) produkovaných imunitním systémem pacienta po expozici viru nebo přítomnost proteinů (antigenů) koronaviru v krvi nebo biologickém materiálu odebraném z horních cest dýchacích.
Abychom pochopili, co imunitní testy detekují, je důležité vědět, jak funguje lidská imunitní odpověď. Poté, co koronavirus vstoupí do těla, je aktivovánbuňky produkující protilátky proti němu ve třídě M (IgM). Postupem času jsou protilátky IgM postupně nahrazeny protilátkami třídy G (IgG). Kromě toho tělo produkuje protilátky třídy A (IgA), které lze také použít při diagnostice koronaviru SARS-CoV-2. Jde o protilátky, které jsou důležité především tehdy, jsou-li měřeny v sekretech dýchacích cest, protože tam jich tělo produkuje nejvíce.
Stojí za zmínku, že doba výskytu jednotlivých protilátek se u různých patogenů liší. V případě infekce koronavirem SARS-CoV-2 je tato doba přibližně 2 týdny. A to je jedno z největších omezení imunologického výzkumu.
Od okamžiku infekce koronavirem do tvorby specifických protilátek (přibližně 2 týdny) mohou chybět nebo jsou příliš nízké na to, aby je bylo možné detekovat laboratorním testem. V této situaci máme falešně negativní výsledek, tj. osoba je infikována koronavirem, ale test ukazuje negativní výsledek. Takové výsledky lze také získat u imunodeficientních jedinců, jejichž mechanismus tvorby protilátek je narušen.
V diagnostických laboratořích se k průkazu IgM, IgA a IgG protilátek proti koronaviru, případně jeho antigenům, používají imunoenzymatické, imunochemické a imunoblotovací metody
Výraznou výhodou imunoanalýzy oproti molekulárním metodám je to, že dokážou identifikovat osoby dříve infikované koronavirem SARS-CoV-2, dokonce i ty, kteří byli infikováni asymptomaticky.
Nevýhodou koronavirových imunoanalýz je však riziko získání falešně pozitivních výsledků, to znamená, že osoba není infikována koronavirem, ale test ukazuje pozitivní výsledek. Taková situace může nastat například u lidí, kteří jsou infikováni jinými viry z rodiny koronavirů.
Stručně řečeno, sérologické testy detekující protilátky proti koronaviru SARS-CoV-2 mohou pomoci při diagnostice infikovaných lidí, ale nepoužívají se k potvrzení aktivních případů koronavirových infekcí. Imunotesty mohou být užitečné pro epidemiologický dohled k identifikaci lidí, kteří měli v anamnéze infekci koronavirem.
Testy na koronavirus – Rychlé diagnostické testy
V reakci na pandemii COVID-19 a potřebu rychlé diagnostiky nakažených lidí a omezenou kapacitu diagnostických laboratoří, testy na tzv. rychlá diagnostika koronaviru, tedy kazetové testy. Kazetové testy jsou založeny na principu podobném principu fungování testůtěhotenství, které si můžete zakoupit v lékárně a používat imunochromatografické metody.
K jejich provedení potřebujete odebrat malé množství krve z vašeho prstu. Velkou výhodou těchto testů je možnost provedení testu mimo laboratoř a získání výsledku po několika či několika desítkách minut
Tyto testy jsou ve skutečnosti určitým typem imunotestu, protože testují přítomnost proteinů (antigenů) koronaviru ve vzorku odebraném z dýchacího traktu nebo přítomnost protilátek vytvořených proti viru v krvi. Aby však takový test poskytl spolehlivé výsledky, vyžaduje náležitou validaci, tj. potvrzení jeho důvěryhodnosti.
Špatně zvolené rychlé diagnostické testy nemusí detekovat infikované lidi (falešně negativní výsledky) nebo dát falešně pozitivní výsledky u zdravých lidí.
Na základě současných údajů Světová zdravotnická organizace nedoporučuje použití rychlých diagnostických testů pro detekci protilátek v péči o pacienty, a to kvůli stále nedostatečným vědeckým důkazům. Vyzývá však k pokračování výzkumné práce s cílem určit jejich vhodnost pro monitorování infekcí a epidemiologické studie.
Testy na koronavirus – jak vypadá sběr výzkumného materiálu?
Pro získání spolehlivého výsledku testu na koronavirus je velmi důležité shromáždit vhodný biologický materiál pro testování. Odběr na molekulární vyšetření zahrnuje získání výtěru z nosohltanu nebo hrdla speciálním výtěrem.
Výzkum není pro člověka, od kterého je materiál sbírán, příliš příjemný. V některých případech mohou být alternativní volbou vzorky z dolních cest dýchacích, jako je sputum nebo tekutina BAL.
Při odběru vzorku z nosohltanové dutiny osoba odebírající výtěr zasune výtěr hluboko přes nos pacienta a několikrát s ním po dobu několika sekund otáčí. Zákrok se provádí v obou nosních dírkách.
Na druhou stranu, pokud je vzorek odebrán současně z krku a sliznice nosu, tampon se nejprve zavede hluboko do krku. Poté jej sbírající osoba několikrát otočí a otírá o povrch sliznice hltanu. Poté se tampon vloží do obou nosních dírek. Z ohybu lokte se odebírá žilní krev na imunologické testy.
Testy na koronavirus – kdo by měl test provést?
- lidé s příznaky podobnými chřipce, jako je vysoká horečka, přetrvávající kašel, dušnost
- lidí, kteří cestovali do oblastí s vysokým výskytem COVID-19
- osoba, která měla blízký kontakt s nalezenou osobouInfekce koronavirem SARS-CoV-2
- osoba, která pracuje nebo navštěvuje zdravotnické zařízení, kde se léčí lidé infikovaní koronavirem
Testy na koronavirus – jak interpretovat výsledky imunologických testů?
- vysoká koncentrace IgM (nebo IgA) a IgG protilátek - pravděpodobně aktivní koronavirová infekce, rovněž asymptomatická. V tomto případě by měl být konzultován lékař pro molekulární potvrzení.
- vysoká koncentrace IgM (nebo IgA) a nízká koncentrace IgG - pravděpodobně aktivní koronavirová infekce, rovněž asymptomatická. V tomto případě by měl být konzultován lékař pro molekulární potvrzení.
- nízká koncentrace IgM (nebo IgA) a vysoká koncentrace IgG – možná anamnéza infekce koronavirem
- nízká koncentrace IgM (nebo IgA) a koncentrace IgG – pravděpodobně žádná infekce nebo kontakt s koronavirem. Negativní výsledek imunotestu však nevylučuje aktivní infekci.
Testy na koronavirus – jak interpretovat výsledky molekulárních testů?
- negativní – v testovaném materiálu nebyl detekován žádný koronavirus SARS-CoV-2. To znamená bez nákazy koronavirem, ale pozor, jediný negativní výsledek testu nevylučuje nákazu koronavirem, a to zejména u vysoce exponovaných osob, pokud se test provádí pomocí výtěru z nosohltanu a na začátku infekce. V tomto případě může být vhodné opakovat test nebo odebrat vzorek z hlubších dýchacích cest, jako je BAL.
- undiagnostic - znamená to, že vzorek není vhodný pro testování a měl by být odebrán jiný
- neprůkazné / neprůkazné - znamená to, že výsledek je na hranici analytické citlivosti testu a vyžaduje další vzorek po 24-48 hodinách
- pozitivní - V testovaném materiálu byl detekován koronavirus SARS-CoV-2. To znamená aktivní infekci koronavirem a vyžaduje okamžitý kontakt s hygienickou a epidemiologickou stanicí
Testy na koronavirus – kde je lze provést?
Lidé podezřelí z nákazy koronavirem by se měli hlásit na nejbližší hygienickou a epidemiologickou stanici, kde budou informováni, kde budou moci provést refundovaný molekulární test na koronavirus.
Ministerstvo zdravotnictví navíc postupně aktualizuje seznam laboratoří, kde se provádějí testy na koronavirus: seznam laboratoří COVID
Za poplatek lze v komerčních laboratořích provádět molekulární, imunologické a kazetové testy
- Jak si umýt ruce?
- Antibakteriální gely a tekutiny – chrání?proti viru SARS-CoV-2?