Testy na lymskou boreliózu by měly být prováděny pokaždé, když došlo ke kousnutí klíštěte. Na zahájení diagnózy musíte počkat až několik týdnů. Předtím je možné otestovat klíště, které se nám zakouslo, zda není přenašečem nějaké nemoci. Jaké je testování na lymskou boreliózu a jaká je cena testů?

Testy na boreliózu(bakteriální onemocnění přenášené klíšťaty způsobené Borrelia burgdorferi a jeho odrůdami) by měly být provedeny co nejdříve po přisátí klíštěte

V diagnostice lymské boreliózy se používají specifická diagnostická schémata, která jsou založena především na sérologických metodách

Vezmeme-li však v úvahu složitý patomechanismus onemocnění a omezení laboratorních metod,Lymeská borelióza může způsobit mnoho diagnostických potíží

Proto je na trhu stále více laboratorních testů, které by mohly tento problém vyřešit. Bohužel většina z nich nemá prokázanou diagnostickou hodnotu a neměla by se používat při rutinní diagnostice lymské boreliózy.

Obsah:

    1. Časná místní lymská borelióza – laboratorní testy
    2. Časná diseminovaná lymská borelióza - Lyme test
    3. Pozdní borelióza – jaké testy k detekci boreliózy?
    4. Lymeská borelióza - monitorování léčby
    5. Lymeská borelióza - cirkulující imunitní komplexy
    6. Lymeská nemoc - test transformace lymfocytů (LTT)
    7. Lymeská borelióza – test CD57
    8. Berlioz - test ELFA a CLIA
    9. Lymeská borelióza - vyšetření klíštěte odstraněného z kůže

Časná místní lymská borelióza – laboratorní testy

V této fázi dochází po kontaktu s infikovaným klíštětem k lokální infekci a k ​​tzv. putující erytém (latinsky erythema migrans), což je symptom charakteristický pro lymskou boreliózu.

Přítomnost erytému v místě přisátí klíštěte je dostatečná k diagnostice boreliové infekce . Ranné lokální stadium lymské boreliózy trvá od několika dnů do přibližně 4 týdnů a u pacienta se mohou rozvinout příznaky podobné chřipce.

Jde o nejranější stadium infekce, ve kterém sérologické metody (ELISA a Western bloty) testují přítomnostProtilátky IgM a IgG mohou poskytovat falešně negativní výsledky. V této fázi tzv sérologické okno, tj. počáteční období infekce, ve kterém si tělo ještě nevytváří protilátky proti boreliím.

První protilátky IgM se objevují kolem 2 týdnů nemoci , ale většina lidí jejich přítomnost zjistí až po několika týdnech. V případě negativního sérologického výsledku by měl být test opakován přibližně 3-4 týdny po infekci.

ELISA a Western blot testy jsou hrazeny Národním zdravotním fondem, ale odesílající lékař musí mít důvody pro jejich objednáníSoukromě stojí test ELISA od 30 do 100 PLN a Western blot od 80 do 200 PLN.

Ve velmi rané fázi infekce lze zvážit molekulární PCR testování. Metoda detekuje bakteriální genetický materiál (DNA), který je v tělních tekutinách v raném stádiu infekce nejhojnější. Čím delší je doba od infekce, tím nižší je pravděpodobnost detekce bakteriální DNA.

Je však třeba mít na paměti, žev Polsku stále neexistuje standardizace molekulárních metod v diagnostice lymské boreliózya proto se tato metoda nedoporučuje jako diagnostická nářadí. Bmolekulární dodávka není hrazena Národním zdravotním fondem a stojí mezi PLN 160-200.

Stojí za to vědět

Fáze infekce Borrelia burgdorferi:

  • raná místní lymská borelióza
  • časná diseminovaná lymská borelióza
  • pozdní borelióza

Časná diseminovaná lymská borelióza - Lyme test

V rané fázi diseminované lymské boreliózy je infikováno mnoho orgánů, kloubů, svalů, nervového systému a kardiovaskulárního systému. Časná borelióza se rozvíjí s příznaky, jako jsou bolesti hlavy, zánět lícního nervu, únava nebo ztuhlost šíje. Tato fáze trvá přibližně několik týdnů od okamžiku infekce.

V časném stadiu diseminované lymské boreliózy jsou přítomny protilátky IgM. V 6-8 týdnech po infekci se začnou objevovat i IgG protilátky. Základem diagnostiky v této fázi infekce jsou proto sérologické metody

Sérologická diagnostika lymské boreliózy začíná fází screeningu, tj. citlivým testem ELISA

Pokud je výsledek negativní, znamená to, že nebyly detekovány žádné spirochety Borrelia nebo je výsledek falešně negativní. Pokud je výsledek pozitivní nebo slabě pozitivní, měl by být proveden konfirmační Western blot , který je vysoce specifický, k potvrzení výsledků metodou ELISA.

V případě podezření na neuroboreliózu lze provéstmolekulární PCR test z mozkomíšního moku. Metoda PCR je velmi citlivá a vzhledem k tomu, že počet spirochet Borrelia v mozkomíšním moku je malý, může být užitečná při stanovení diagnózy.

Sama o sobě, bez předchozího sérologického vyšetření, nepředstavuje diagnózu infekce.

Pozdní borelióza – jaké testy k detekci boreliózy?

Posledním stádiem infekce je pozdní borelióza, při které dochází k dalšímu šíření bakterií do orgánů a tvorbě stále závažnějších komplikací infekce. Objevuje se pozdní borelióza, kloubní borelióza nebo atrofická dermatitida. Pozdní borelióza může trvat až několik let.

V této fázi infekce jsou sérologickými metodami detekovány pouze IgG protilátky.Vysoké hladiny IgG proti spirochétám Borrelia a kombinace příznaků svědčí pro lymskou boreliózuV některých případech (zejména u lidí, kteří dostali antibiotickou terapii velmi rychle v raném stadiu infekce), IgM protilátky mohou přetrvávat i několik let. V takových situacích tyto protilátky nesvědčí o aktivní infekci.

Co je to lymská borelióza?

Lymeská borelióza - monitorování léčby

Jednou z největších obtíží v diagnostice lymské boreliózy je nedostatek citlivých a specifických laboratorních markerů, které by mohly posoudit účinnost antibiotické terapie. Standardní metodou pro hodnocení jeho účinnosti je pozorování symptomů onemocnění.

Výzkum ukazuje, že stanovení hladiny IgM a IgG protilátek proti spirochétě VLsE / C6 antigenu může být použito ke sledování účinnosti boreliové infekce

Spirální protein VlsE / C6 způsobuje velmi silnou a rychlou reakci imunitního systému. Přidání tohoto antigenu do souboru sérologických testů výrazně zvyšuje senzitivitu testu. Přítomnost IgG protilátek proti proteinu VLsE / C6 u pacientů s lymskou boreliózou je:

  • 20-50 %u pacientů v rané fázi infekce
  • 70-90 %u pacientů s časnou diseminovanou lymskou boreliózou
  • téměř 100 %u pacientů s pozdní lymskou boreliózou

Test není hrazen Národním zdravotním fondem a stojí 80-150 PLN.

Lymeská borelióza - cirkulující imunitní komplexy

Základem diagnózy lymské boreliózy je sérologické vyšetření. Existují však klinické situace, které by mohly vést k falešně negativnímu výsledku. Jedním z nich je přítomnost tzv imunitní komplexy, které se skládají ze spirochet Borrelia a specifických antigenůIgM nebo IgG protilátky.

Imunitní komplexy blokují protilátky, což znemožňuje jejich detekci sérologickými metodami, a proto mohou způsobit falešně negativní výsledky.Tento problém se vyskytuje hlavně u velmi intenzivních infekcí

Pokud má pacient zjevné příznaky lymské boreliózy a výsledky testu jsou negativní, některé laboratoře nabízejí test, který zahrnuje chemický rozklad imunitních komplexů.Tento postup je zaměřen na uvolnění protilátek a teprve poté měření jejich koncentrace

Výzkum ukazuje, že použití takového postupu před sérologickým vyšetřením může významně zvýšit detekci protilátek proti boreliovým antigenům. Tato metoda se však rutinně nepoužívá kvůli nedostatečné standardizaci v laboratořích.

Cena testu se pohybuje od 110-210 PLN(pro IgM nebo IgG protilátky)a není hrazena Národním zdravotním fondem.

Lymeská nemoc - test transformace lymfocytů (LTT)

Lymphocyte Transformation Test (LTT) se používá v různých oblastech medicíny, včetně v transplantologii, alergologii a nepřímo v diagnostice boreliových spirochet. Při diagnostice lymské boreliózy test identifikuje přítomnost imunitních buněk (T lymfocytů) v krvi pacienta, které byly v kontaktu s bakterií. Test využívá techniku ​​ELISPOT, jejíž princip je podobný metodě ELISA, ale je citlivější než ona

Někteří lidé uvádějí, že by mělo být provedeno testování LTT na Borrelia spirochéty, aby:

  • potvrzení aktivní infekce u lidí s pozitivními výsledky sérologických testů, ale bez příznaků jasně naznačujících onemocnění
  • potvrzení aktivní infekce u lidí s negativními nebo hraničními výsledky sérologických testů, ale s klinickými příznaky onemocnění
  • sledování infekce po léčbě antibiotiky
  • hodnocení recidivy lymské boreliózy

Podle doporučení pracovní skupiny publikovaných v roce 2014 se v diagnostice lymské boreliózy nedoporučuje jak LTT test, tak stanovení hladiny protilátek v cirkulujících imunitních komplexech

Tyto metody je ještě třeba ověřit (tj. potvrdit jejich spolehlivost), aby byly užitečným diagnostickým nástrojem.

Cena testu je 400-550 PLN a není hrazena Národním zdravotním fondem

Lymeská borelióza – test CD57

Povrchový marker CD57 je protein, který se vyskytuje na povrchu imunitních buněk - NK buněk(Natural Killers).

Lékaři ze skupiny ILADS, tedy International Society for Lyme Disease and Related Diseases, se domnívají, že v chronické fázi lymské boreliózy dochází k potlačení imunitního systému, což se projevuje snížením populace NK buněk se značkou CD57.

Předpokládají, že stanovení jejich počtu v krvi lze použít k posouzení aktivity onemocnění. Podobně jako u metody LTT a narušení imunitních komplexů je však třeba tuto metodu ještě ověřit.Cena testu je 170 PLN a není hrazena Národním zdravotním fondem

Více o testu CD57 naleznete zde

Berlioz - test ELFA a CLIA

Metoda ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) se primárně používá v diagnostice lymské boreliózy. Mnoho laboratoří však používá i jiné sérologické metody, jako je ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay) prováděné pomocí Vidas® a CLIA (chemiluminiscenční imunoanalýza) prováděné pomocí analyzátoru Liaison®.

Jaké jsou rozdíly? Princip fungování tří metod je velmi podobný a využívá specifické protilátky a jejich schopnost vázat se na antigeny. Metody ELFA a CLIA umožňují automatizaci analýz a rychlejší provádění testů v laboratoři. Tyto metody jsou také schopny detekovat nižší koncentrace protilátek v testovaném biologickém materiálu

Pokud jde o věrohodnost výsledků získaných třemi metodami, jsou téměř stejné.Pozitivní nebo slabě pozitivní výsledky u metod ELFA a CLIA, stejně jako u metody ELISA, by měly být potvrzeny metodou Western blot

Stojí za to vědět

Lymeská borelióza - vyšetření klíštěte odstraněného z kůže

Některé laboratoře nabízejí testování klíštěte odstraněného z kůže na přítomnost DNA borelií. Podle doporučení pracovní skupiny zveřejněných v roce 2014 taková studie absolutně není diagnostickou metodou lymské boreliózy.

Přestože je riziko přenosu bakterií z klíšťat na člověka úměrné době sání krve, přítomnost DNA spirochety v klíštěti není synonymem infekce a její nepřítomnost infekci nevylučuje.

Zastánci metody věří, že je užitečná při rozhodování o zavedení antibiotické terapie u lidí se symptomy svědčícími pro lymskou boreliózu, ale bez přítomnosti migrujícího erytému.Cena těchto respondentů se pohybuje v rozmezí 100-500 PLN a není hrazena Národním zdravotním fondem

Reference

  1. Laboratorní diagnostika nemocí přenášených klíšťaty Doporučení pracovní skupiny: Národní komoraLaboratorní diagnostici, Národní ústav veřejného zdraví – Národní ústav hygieny, Národní konzultant v oblasti infekčních nemocí, Oddělení infekčních nemocí a neuroinfekcí, Lékařská univerzita v Białystoku, Polská virologická společnost, Varšava 2014.
  2. Rychlik U. et al Laboratorní diagnostika testu transformace lymfocytů (LTT). Journal of Laboratory Diagnostics 2013, 49 (4); 425-428.
  3. Marques A. R. Laboratorní diagnostika lymské boreliózy – pokroky a výzvy. Infikovat Dis Clin North Am. 2015; 29 (2): 295-307.
  4. Marques A. et al. Počty přirozených zabijáckých buněk se mezi pacienty se syndromem po lymské borelióze a kontrolami neliší. Clin Vaccine Immunol. 2009; 16: 1249-1250.
  5. Krzemień P. J. Význam antigenu Vlse / C6 jako markeru v diagnostice časné lymské boreliózy a studium účinnosti její léčby. Zdravotní problémy civilizace 2022; 11 (2): 87-92.
  6. Miąskiewicz K. et al Návrh nového metodologického přístupu a interpretace výsledků protilátek proti Borrelia burgdorferi - analýza protilátkového složení cirkulujících imunitních komplexů. Revmatologie 2011; 49, 5: 328-334.
  7. Muraczyńska B. a Gałęziowska E. Kontroverze související s diagnostikou a léčbou lymské boreliózy ve světě. Všeobecné lékařství a zdravotnictví, 2015; 21 (4): 372-377.
O autoroviKarolina Karabin, MD, PhD, molekulární bioložka, laboratorní diagnostika, Cambridge Diagnostics PolskaProfesí biolog se specializací na mikrobiologii a laboratorní diagnostik s více než 10letou praxí v laboratorních pracích. Absolvent Vysoké školy molekulární medicíny a člen Polské společnosti humánní genetiky Vedoucí výzkumných grantů v Laboratoři molekulární diagnostiky na Klinice hematologie, onkologie a vnitřních nemocí Lékařské univerzity ve Varšavě. Titul doktora lékařských věd v oboru lékařská biologie obhájila na 1. lékařské fakultě Lékařské univerzity ve Varšavě. Autor mnoha vědeckých a populárně vědeckých prací z oblasti laboratorní diagnostiky, molekulární biologie a výživy. Denně jako specialista v oblasti laboratorní diagnostiky vede obsahové oddělení v Cambridge Diagnostics Polska a spolupracuje s týmem nutričních specialistů CD Dietary Clinic. Své praktické poznatky z diagnostiky a dietoterapie nemocí sdílí s odborníky na konferencích, školeních, v časopisech a na webových stránkách. Zajímá se zejména o vliv moderního životního stylu na molekulární procesy v těle.

Kategorie:

Výzkum