- Průtoková cytometrie – co ukazuje?
- Průtoková cytometrie - aplikace
- Průtoková cytometrie – budoucnost
Průtoková cytometrie je diagnostická a výzkumná technika známá již řadu let a široce používaná v onkologii. Průtoková cytometrie umožňuje buňkám, které tvoří suspenzi v laminárním nebo stratifikovaném proudu kapaliny, vyšetřit pomocí zařízení zvaného průtokový cytometr. Jaké jsou indikace pro průtokovou cytometrii a jak se provádí?
Průtoková cytometriese používá v diagnostice hematologických novotvarů, protože jde o tekuté nádory, ale je to pouze pomocná metoda. Je však třeba připomenout, že existuje jedna rakovina, kterou lze diagnostikovat pouze touto metodou. Toto je chronická lymfocytární leukémie.
U jiných neoplastických onemocnění se průtoková cytometrie používá jako diagnostická pomůcka, protože ukazuje velmi důležité vlastnosti neoplastických buněk. Tato metoda se také používá k hodnocení účinnosti aplikované léčby.
Průtoková cytometrie – co ukazuje?
Proud kapaliny obsahující testované částice proudí konstantní rychlostí (100-2000 částic za sekundu) přes měřicí oblast cytometru. Zde se optickými metodami analyzují tvary, rozměry, vnitřní struktura buněk a jejich obsah, např. DNA. Všechny buňky jsou opticky označeny
K měření se využívají vlastnosti rozptylu laserového světla jednotlivými buňkami nebo jejich složkami (jádra, chromozomy, mitochondrie) nebo jimi indukovaná fluorescence
Optické signály jsou převedeny na elektrické signály, které jsou po analýze graficky prezentovány ve formě mono- nebo biparametrického rozdělení.
Cytometr také umožňuje segregaci částic po opuštění měřicí zóny. Dá se říci, že přístroj uspořádá (segreguje) buňky se stejnými základními prvky (preparativní třídění) nebo extrahuje specifické typy buněk (analytické třídění).
Průtoková cytometrie umožňuje studium populačních charakteristik buněk, analýzu buněčných složek (zejména jako jsou nukleové kyseliny, proteiny, povrchové a buněčné antigeny), enzymatickou aktivitu, membránový potenciál, mitochondriální aktivitu, intracelulární pH, transport iontů a tekutost membrány.
Průtoková cytometrie - aplikace
Používá se v diagnosticeprůtoková cytometrie umožňuje stanovit fenotyp neoplastických buněk a expresi jednotlivých proteinů. K tomu se používají značené fluorescenční protilátky, které se charakteristickým způsobem vážou na antigeny na povrchu buněčné membrány. Díky tomu je možné určit stupeň jejich diferenciace, původ, prognostické a terapeutické markery, které usnadňují rozhodování o dalších diagnostických a terapeutických postupech
Další aplikací pro průtokovou cytometrii je sledování účinnosti aplikované léčby hodnocením tzv. "reziduální onemocnění", což je procento buněk s fenotypy podobnými nádoru, které zůstanou po léčbě.
Průtoková cytometrie také usnadňuje výzkum rakoviny. Díky této metodě je možné vyhledávat např. receptory, které jsou na povrchu neoplastických buněk a mohou se stát cílem léčby
Metoda umožňuje vyhodnotit aktivitu proteinů uvnitř buňky. Je také možné posoudit buněčný cyklus, např. stanovením množství DNA v buňce.
V průběhu proliferace prochází buňka fázemi buněčného cyklu, ve kterých zdvojnásobuje množství DNA. Posouzením tohoto množství je možné naznačit, v jaké fázi se buňky nacházejí, zda proliferují nebo ne, nebo zda přecházejí do apoptózy. Jinými slovy, pomocí průtokové cytometrie můžete zjistit, zda se buňky připravují na apoptózu, což je proces programované smrti.
Průtoková cytometrie – budoucnost
Průtoková cytometrie je známá a používaná v medicíně již několik desítek let. Neustále se však zdokonaluje a vytváří nové diagnostické a výzkumné možnosti. V prvním období používání této metody bylo možné určit pouze velikost a stupeň zrnitosti buněk.
Použití laserového světla v přístrojích pro průtokovou cytometrii umožňuje vybudit určité fluorescenční markery a následně vyhodnotit jejich emisi. Moderní cytometry umožňují výrazné zvýšení počtu markerů, které jsou hodnoceny najednou, což se rozhodně promítá do zvýšení citlivosti této metody.
Proto se používá nejen k diagnostice neoplastických onemocnění, ale také k posouzení účinnosti léčby.
O autoroviAnna JaroszováNovinář, který se přes 40 let zabývá popularizací zdravotní výchovy. Vítěz mnoha soutěží pro novináře zabývající se medicínou a zdravím. Dostala mj Ocenění „Zlatý OTIS“ Trust Award v kategorii „Média a zdraví“, St. Kamila při této příležitosti oceněnaSvětový den nemocných, dvakrát „Křišťálové pero“ v celostátní soutěži pro novináře propagující zdraví a mnohá ocenění a vyznamenání v soutěžích o „Lékařský novinář roku“ pořádaných Polským svazem novinářů pro zdraví.Přečtěte si další články tohoto autora